南宫28NG细胞冻存试剂盒使用说明书

一、产品简介

南宫28NG细胞冻存试剂盒适用于各种哺乳动物原代细胞和传代细胞系的冻存和保种。复苏后，能够有效保持细胞的存活率，且储存稳定，操作简便。

产品组分：南宫28NG细胞冻存液，BA3309，100mL。

保存条件：-20℃避光保存，有效期两年。

注意事项

1. 使用水平离心机，并设置合适参数，以避免因操作不当影响实验结果。

2. 本产品为无菌产品，请穿实验服并佩戴一次性手套，注意无菌操作，避免微生物污染。

3. 使用前需确保试剂完全融化并混匀。

4. 冻存前尽量确保细胞状态良好。

自备材料

细胞冻存材料：

• 仪器：水平离心机、细胞计数仪、-80℃冰箱。
• 耗材：细胞冻存管、程序性冻存盒、低吸附枪头。

二、细胞复苏材料

细胞复苏材料：

• 仪器：水平离心机、水浴锅。
• 试剂：RPMI 1640培养基。
• 耗材：酒精棉球、低吸附枪头、离心管。

使用方法

细胞冻存

1. 使用前将南宫28NG细胞冻存液完全融化并混匀。

2. 通过细胞计数仪计算出细胞总数。细胞的冻存密度一般为1x10^6/mL。

3. 将细胞离心，弃上清，保留细胞沉淀。不同细胞类型的离心条件不同，例如人PBMC细胞的离心条件为300xg，5min。

4. 根据细胞数量计算需加入的细胞冻存液体积，用移液枪吸取，轻轻吹打重悬细胞。

5. 将重悬的细胞分装至专用的细胞冻存管中，并进行标记。注意：必须使用专门用于液氮冻存的细胞冻存管，不能使用普通离心管。

6. 将细胞冻存管放置于可逐步降低温度的装置如程序性冻存盒，再放入-80℃冰箱，确保温度下降速度约为1℃/min。24小时后可转移至液氮中，保存时间更久。

细胞复苏

1. 打开恒温水浴锅，设置为37℃，取一离心管，加入5mL细胞培养基，在37℃水浴锅中温浴至培养基37℃，约2~5分钟。

2. 取出冻存管，立即放入水浴锅中快速摇晃，迅速融化冻存液。

3. 完全融化后，立即用酒精棉球擦洗冻存管外部，以降低污染风险。

4. 打开冻存管，将冻存液一滴一滴地加入到已预热的培养基中，同时轻轻摇晃，结束后放入水平离心机，以4℃、300xg离心5分钟。

5. 弃去上清，加入适量培养基重悬细胞。

南宫28NG相信品牌力量，作为一家专注于免疫学、细胞生物学、分子生物学等领域核心试剂产品研发的企业，我们致力于为客户提供优质的生物医疗解决方案。